Амідаза (AMD)
ферменты:З'яўляюцца высокамалекулярнымі біялагічнымі каталізатарамі, большасць ферментаў - вавёркі
Амідаза:Каталізуюць гідроліз розных эндагенных і чужародных аліфатычных і араматычных амідаў шляхам перадачы ацыльнай групы вадзе з адукацыяй свабодных кіслот і аміяку.Гидроксамовая кіслата і іншыя арганічныя кіслоты шырока выкарыстоўваюцца ў якасці лекавых сродкаў, таму што яны ўваходзяць у склад фактараў росту, антыбіётыкаў і інгібітараў пухлін.Амідазы можна падзяліць на ацылазы тыпу R і тыпу S у залежнасці ад стэрэаселектыўнасці каталізатара.
У дадатак да каталізу гідролізу амідаў, амідаза можа таксама каталізаваць рэакцыі пераносу ацылу ў прысутнасці субстратаў, такіх як гідраксіламін.
Амідазы з розных крыніц маюць розную субстратную спецыфічнасць, некаторыя з іх могуць гідралізаваць толькі араматычныя аміды, некаторыя з іх могуць гідралізаваць толькі аліфатычныя аміды, а некаторыя - α-ці ω-амінаміды.Большасць амінаў маюць добрую каталітычную актыўнасць толькі для ацыклічных або простых араматычных амідаў, але для складаных араматычных амідаў гетэрацыклічныя аміды, асабліва аміды з орта-замяшчальнікамі, звычайна маюць нізкую актыўнасць (толькі некаторыя ферменты праяўляюць лепшы каталітычны эфект).
Каталітычны механізм:
ферменты | Код прадукту | Код прадукту |
Ферментны парашок | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | набор з 19 амідаз, па 50 мг кожная 19 штук * 50 мг / штука або іншая колькасць |
Камплект скрынінга (SynKit) | ES-AMD-1900 | набор 19 амідаз па 1 мг 19 шт * 1 мг / шт |
★ Высокая субстратная спецыфічнасць.
★ Моцная хиральная селектыўнасць.
★ Высокая эфектыўнасць пераўтварэння.
★ Менш пабочных прадуктаў.
★ Мяккія ўмовы рэакцыі.
★ Экалагічна чысты.
➢ Скрынінг ферментаў трэба праводзіць для пэўных субстратаў з-за спецыфічнасці субстрата і атрымаць фермент, які каталізуе мэтавы субстрат з найлепшым каталітычным эфектам.
➢ Ніколі не кантактуйце з экстрэмальнымі ўмовамі, такімі як: высокая тэмпература, высокі/нізкі pH і арганічны растваральнік з высокай канцэнтрацыяй.
➢ У норме рэакцыйная сістэма павінна ўключаць субстрат, буферны раствор (Аптымальны pH рэакцыі фермента).Субстраты, такія як гідраксіламін, павінны прысутнічаць у рэакцыйнай сістэме ацыльнага пераносу.
➢ AMD трэба дадаваць у апошнюю чаргу ў рэакцыйную сістэму з аптымальным pH і тэмпературай рэакцыі.
➢ Усе віды ВМД маюць розныя аптымальныя ўмовы рэакцыі, таму кожны з іх павінен быць дадаткова вывучаны індывідуальна.
Прыклад 1(1):
Актыўнасць гідралізу да розных амідных субстратаў
Субстрат | Канкрэтная дзейнасць мкмоль мін-1mg-1 | Субстрат | Канкрэтная дзейнасць мкмоль мін-1mg-1 |
Ацэтамід | 3.8 | ο-OH бензамід | 1.4 |
Пропионамид | 3.9 | p-OH бензамід | 1.2 |
Лактамід | 12.8 | ο-NH2бензамід | 1.0 |
Бутырамід | 11.9 | p-NH2бензамід | 0,8 |
Изобутирамид | 26.2 | ο-Талуамід | 0,3 |
Пентанамід | 22.0 | p-Талуамід | 8.1 |
Гексанамид | 6.4 | Нікацінамід | 1.7 |
Циклогексанамид | 19.5 | Изоникотинамид | 1.8 |
Акрыламід | 10.2 | Пікалінамід | 2.1 |
Метакрыламід | 3.5 | 3-Фенилпропионамид | 7.6 |
Пралінамід | 3.4 | Індол-3-ацетамид | 1.9 |
Бензамід | 6.8 |
Рэакцыю праводзілі ў 50 мМ буферным растворы фасфату натрыю, pH 7,5, пры 70 ℃.
Аміды | Гідраксіламін | Гідразін |
Ацэтамід | 8.4 | 1.4 |
Пропионамид | 18.4 | 3.0 |
Изобутирамид | 25,0 | 22.7 |
Бензамід | 9.2 | 6.1 |
Рэакцыю праводзілі ў 50 мМ буферным растворы фасфату натрыю, pH 7,5, пры 70 ℃.
Адпаведная канцэнтрацыя рэагентаў: аміды, 100 мМ (бензамід, 10 мМ);гидроксиламин і гідразін, 400 мМ;фермента 0,9 мкМ.
Прыклад 2(2):
Прыклад 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S. і інш.Экстрэмафілы, 2001, 5:183-192.
2. Го Ф.М., Ву Дж.П., Ян Л.Р. і інш.Біяхімія працэсаў, 2015, 50 (8): 1400-1404.
3. Чжэн RC, Jin JQ, Wu ZM і інш.Bioorganic Chemistry, 2017, даступны ў Інтэрнэце 7.